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原理聚丙烯酰胺凝膠電泳(Polyacrylamidegelelectrophoresis,PAGE),是以聚丙烯酰胺凝膠為支持介質的一種常用電泳技術。SDS(十二烷基硫酸鈉)是陰離子表面活性劑,作為變性劑和助溶試劑,它能斷裂分子內和分子間的氫鍵,使分子去折疊,從而破壞蛋白分子間的二、三級結構。而強還原劑如β-巰基乙醇,二硫蘇糖醇(DTT)均能使半胱氨酸殘基間的二硫鍵斷裂。在樣品和凝膠中加入還原劑和SDS后,分子被解聚成多肽鏈,解聚后的氨基酸側鏈和SDS結合成蛋白-SDS膠束,...
包被液有哪些?Vitronectin玻連蛋白是血清和組織中的關鍵細胞粘附因子,通過與糖胺聚糖和蛋白聚糖結合,在細胞相互作用中發揮著至關重要的作用。它被特定的整合素識別并作為重要的粘附分子,促進細胞-基質相互作用。Matrigel是一種從小鼠肉瘤中提取的、可溶的基底膜基質。在室溫或體溫下,它能從液態凝固成凝膠狀,為細胞生長提供一個模擬體內真實環境的三維支架。要準備的試劑iPSC培養基ROCK抑制劑EDTA溶液DPBSIPSC復蘇預熱平板:提前1h取出包被好的平板,室溫平衡快速化...
SDS是一種陰離子去垢劑,在生物化學和分子生物學領域用途廣泛。SDS的用途:蛋白質變性劑:SDS能夠斷裂蛋白質分子內和分子間的氫鍵,使蛋白質去折疊,破壞其二、三級結構。在SDS-PAGE(聚丙烯酰胺凝膠電泳)中,SDS與蛋白質結合,使所有蛋白質帶上負電荷,且電荷量遠超原有電荷,從而消除不同分子間的電荷差異和結構差異,使蛋白質按分子量大小分離。核酸提取:SDS可以裂解細胞膜,釋放細胞內的核酸,同時使與核酸結合的蛋白質變性,從而實現核酸與蛋白質的分離。在DNA提取過程中,SDS能...
造血干細胞的體外擴增是細胞治療、基因療法和造血重建的關鍵環節。傳統含血清培養體系存在批次不穩定、免疫原性風險和病原體污染隱患,因此,無血清造血干細胞培養基已成為臨床級HSC生產的發展方向。在無血清體系中,細胞因子作為調控HSC命運的核心信號分子,其組合與濃度配比的優化至關重要。HSC的自我更新、增殖與分化受多種細胞因子協同調控。目前廣泛使用的細胞因子包括干細胞因子(SCF)、血小板生成素(TPO)、FMS樣酪氨酸激酶3配體(FLT3-L)和白細胞介素-6(IL-6)等。其中,...
干細胞因其具有自我更新和多向分化潛能,在再生醫學、疾病模型構建和藥物篩選等領域展現出巨大應用前景。然而,維持干細胞的未分化狀態或引導其定向分化,高度依賴于其所處的微環境,其中干細胞培養基中的生長因子扮演著至關重要的調控角色。生長因子是一類具有生物活性的蛋白質或多肽,通過與干細胞表面特異性受體結合,激活細胞內復雜的信號通路,從而精確調控細胞的命運決定。在干細胞培養基中,不同生長因子發揮著獨特而協同的作用。例如,堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)是維持人胚胎干細胞(hESCs)和...
關于造血干細胞造血干細胞是一種原始未分化的細胞,具有自我更新能力和分化為各類血細胞的潛能。它們負責持續生成紅細胞、白細胞、血小板等,維持人體血液系統的正常功能,是治療血液疾病、免疫缺陷及某些癌癥的關鍵生物資源。骨髓是造血干細胞的主要來源,尤其在成年個體中。骨髓中含有大量造血干細胞,具有長期自我更新和分化成各類血細胞的潛能。骨髓移植是最早應用的造血干細胞移植形式,其優點是干細胞數量充足且植入成功率較高。通過注射粒細胞集落刺激因子(G-CSF)等動員劑,可將骨髓中的造血干細胞釋放...

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